Otkriće mutacije u genu BRAF kao pokretačke mutacije u melanomu omogućilo je razvoj ciljanih inhibitora koji su promijenili liječenje pacijenata oboljelih od melanoma. Kombinirana terapija ciljanjem kinaza BRAF i MEK je, uz imunoterapiju, uobičajeni terapijski pristup za pacijente koji posjeduju mutaciju BRAF p.V600E. Međutim, većina pacijenata razvija otpornost čiji temeljni molekulski mehanizmi još uvijek nisu u potpunosti razjašnjeni i predstavljaju veliki izazov u liječenju melanoma. U predloženom istraživanju planiramo uspostaviti stanične linije melanoma iz biopsija pacijenata otpornih na inhibitore kinaza BRAF/MEK i istražiti mehanizme uočene otpornosti. Podaci dobiveni s cBioPortala ukazuju na važnost prisutnosti mutacija u članovima obitelji p53 u melanomima (mutacije u TP53 i/ili TP63 se javljaju u približno 40% svih uzoraka melanoma) i posebno ih treba uzeti u obzir u BRAF-mutiranim tumorima u kojima se mutacije u TP53 i TP63 pojavljuju u 21,6%, odnosno 14,7% slučajeva. Štoviše, rezultati naših dosadašnjih istraživanja, kao i rada drugih grupa, ukazuju da bi promijenjena ekspresija i poremećaj regulacije izoformi obitelji p53 mogli pospješiti razvoj otpornosti na terapiju inhibitorima BRAF/MEK kod metastatskog melanoma. Shodno tome, nakon određivanja mutacijskog statusa, profila ekspresije i unutarstanične lokalizacije izoformi, kao i njihovih međusobnih interakcija, utvrdit ćemo funkcionalni odnos između članova obitelji p53. S ciljem određivanja uloge specifičnih izoformi obitelji p53 u melanomu otpornom na inhibitore BRAF/MEK, utišat ćemo ekspresiju izoformi i provesti različite biološke testove. Uvjereni smo da će predloženo istraživanje rasvijetliti molekulske mehanizme otpornosti stanica melanoma na inhibitore BRAF/MEK posredovane proteinom p53 i utvrditi specifičan obrazac ekspresije izoformi p53 obitelji koji bi mogao ukazivati na učinkovitost ciljane terapije te otkriti moguće terapijske ciljeve.